【摘要】目的分析结直肠癌组织中miR-21的表达及其临床病理学意义。方法选取我院2010年1月——2010年12月间手术切除的结直肠癌标本30例作为研究对象，通过采用TaqMan实时定量RT-PCR法对该组标本中的结直肠癌组织miR-21的表达进行检测，并与其癌旁正常组织miR-21的表达进行对比观察，从而探讨结直肠癌临床病理因素与miR-21的表达之间的关系。结果通过与对比癌旁正常组织miR-21的表达进行对比观察发现，结直肠癌组织miR-21的表达明显要高很多，差异具有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌组织miR-21的表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位等情况没有较大的关联，而与其淋巴结转移、肿瘤病理学分级、及术后生存率三个方面有着紧密的关系。结论结直肠癌组织miR-21的表达要高于正常组织，并且它可能与大肠癌的发生及肿瘤的生长有着密切的联系。
【关键词】结直肠癌；miR-21；临床意义
随着科学技术水平和医疗水平的进步与发展，对于病理的研究也更加深入。临床研究表明，在所有与肿瘤相关的因素中，有一个关系非常密切的基因-miRNA，这也是目前肿瘤学中的重点研究内容[1]，为了进一步分析结直肠癌组织中miR-21的表达及其临床病理学意义，本文，选取我院2010年1月——2010年12月间手术切除的结直肠癌标本30例作为研究对象，通过采用TaqMan实时定量RT-PCR法对该组标本中的结直肠癌组织miR-21的表达进行分析探讨。现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料选取我院2010年1月——2010年12月间手术切除的结直肠癌标本30例作为研究对象，并设为观察组，同时取癌旁正常组织设为对照组。本组所有标本都是取自于未实施化疗、放疗的患者，患者在手术切除后立即取样，并通过RNAalter保护液保护，放置于零下二十度的冰箱冷冻保存，确保标本的可靠性、无污染性及不会变质。
1.2方法本次使用的仪器为美国ABI公司生产的Real-time PCR仪和德国EPPENDORF公司生产的分光光度仪，试剂主要包括TaqMan 2 ×universal PCR master mix、mirvana PARIS kit、TaqMan microRNA assays、TaqMan microRNA reverse transcription kit等常规试剂。具体操作步骤可以分为以下几个方面：首先是提取总RNA，使用的试剂主要是 mirvana PARIS kit，具体操作方法则根据说明书，然后检测其A260/A280吸光值，使用的仪器为德国EPPENDORF公司生产的分光光度仪。试剂提取出来之后应放置在零下二十度冰箱冷冻保存，防止标本发生质变；其次是采用TaqMan实时定量RT-PCR，采用的试剂为TaqMan microRNA assays，操作方法根据说明书进行，在此过程中要根据实际要求注意反转录体系、反应条件和反应体系[2]。
1.3数据处理将本次统计调查的实验数据均录入SPSS17.0软件包进行统计学分析，miR-21的表达数据以中位数和四分位数间距表示。对于组织间的表达差异主要采用mann-whitney U检验和配对样本的非参数wilcoxon符号秩和检验，前者主要针对于不同临床病理学分组间的表达差异，后者主要针对于肿瘤与其正常组织间的表达差异，以P<0.05为差异具有统计学意义[3]。
2结果
通过与对比癌旁正常组织miR-21的表达进行对比观察发现，结直肠癌组织miR-21的表达明显要高很多，差异具有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌组织miR-21的表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位等情况没有较大的关联，而与其淋巴结转移、肿瘤病理学分级、及术后生存率三个方面有着紧密的关系。
3讨论
在所有的恶性肿瘤之中，结直肠癌是最常见也是致死率最高的类型之一，且其发病机制和病情变化过程也非常复杂。大量的临床研究资料表明，在肿瘤的生长演变过程中一个重要的部分便是miRNA，它贯穿了整个肿瘤生命演变的过程，从细胞的分裂、细胞增殖与凋亡、胚胎发育等等[4]。随着科学技术水平也医疗技术水平的进步发展，对miRNA的研究也更加深入，并发现在miRNA中有一项基因的表达非常之高，那便是miR-21，miR-21也被认为是一种癌基因。本次研究主要通过采用TaqMan实时定量RT-PCR法对标本中的结直肠癌组织miR-21的表达进行检测，并与其癌旁正常组织miR-21的表达进行对比观察，从而探讨结直肠癌临床病理因素与miR-21的表达之间的关系，结果表明，结直肠癌组织miR-21的表达要高于正常组织，与相关研究的结论保持一致，由此可以说明，miR-21是一种结直肠癌的癌基因，它在机体内对结直肠癌起到了促进生长和发展的作用，并且它可能与大肠癌的发生及肿瘤的生长有着密切的联系。miR-21有可能成为结直肠癌预后的新指标及治疗靶点。
参考文献
[1]鲁华东，刘忠臣，潘超，吕彦，殷平.结直肠癌中miR-21的表达及其临床病理学意义[J].临床与实验病理学杂志，2013，（05）：516-519.
[2]张彩兰，刘斌，杨艳丽，苏勤军，史敏，韩军平，钱震，董亮，哈英娣.癌干细胞CD44-+/ALDH-+在结直肠癌中的表达及其临床病理学意义[J].世界华人消化杂志，2012，（31）：3005-3009.
[3]王雪晴，石群立，王建东，马恒辉，周晓军.结直肠癌组织中miR-195和miR-497的表达差异及临床病理学意义[J].医学研究生学报，2012，（11）：1163-1167.
[4]王璇，王建东，罗春英，马恒辉，时姗姗，周晓军.结直肠癌中K-ras基因突变的检测及其临床病理学意义[J].医学研究生学报，2013，（01）：19-22.
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