[摘要] 目的 应用近红外漫反射技术建立雷公藤多甙片一致性检验模型快检方法。 方法 收集雷公藤多甙片的近红外漫反射光谱，运用OPUS 软件建立一致性检验模型，并用雷公藤多甙片伪品进行验证。 结果 正品雷公藤多甙片与伪品有较大差别，利用该一致性检验模型能快速、准确地判断雷公藤多甙片的真伪。 结论 该方法建立的模型操作简单、快速有效，能作为雷公藤多甙片真伪鉴别的快速筛选方法。
[关键词] 近红外光谱； 雷公藤多甙片； 一致性检验
[中图分类号] R286.0 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）31-0061-02
近红外光谱（near infra red spectrum，NIR），指的是780～2526 nm范围内的电磁波，它介于紫外可见光谱区域和中红外光谱区域之间。近红外光谱的特点是吸收系数较低、无损、快速、无污染，因此可以直接对样品进行测定，不需样品处理或仅需简单的处理，在计算机软件的支持下，可实现对近红外光谱建立模型、快速分析样品光谱的功能。近红外光谱的模型分为定性鉴别模型和定量分析模型，其中定性鉴别模型中以快速比对模型最为简单，在合理的样品和建模参数条件下，模型的准确率也较高。一致性检验模型属于近红外光谱快速比对模型之一。一致性检验是一种快捷的、简便的图谱比较方法，能快速区分未知光谱与某一组参考光谱是否具有一致性[1]。
雷公藤多甙片具有祛风解毒、解湿消肿、舒经通络的功效及抗炎及抑制细胞和体液免疫等作用，其广泛用于风湿热瘀，毒邪阻滞所致的类风湿性关节炎、肾病综合征、白塞氏三联症、麻风反应、自身免疫性肝炎等。本文收集雷公藤多甙片正品近红外光谱图建立一致性模型，并利用其它厂家生产的雷公藤多甙片来验证模型的准确性，结果表明：雷公藤多甙片一致性模型能快速、准确地鉴别出该厂生产该品种，故本方法可以作为本厂该规格雷公藤多甙片的快速鉴别方法载入到药品快检车上运用，能准确地考察该厂生产的雷公藤多甙片的质量，有效地打击了制售冒牌产品的行为。
1 仪器与试药
1.1 仪器
布鲁克公司生产Matrix-F 型近红外光谱仪，配有光纤探头测样附件，铟镓砷（InGaAs）检测器，OPUS 5.0 光谱分析软件（英文版及OPUS 6.5 中文版）。Waters2695_2489型高效液相色谱仪，梅特勒XP205型电子天平（d=0.01 mg/0.1 mg），经标定的A级100 mL、50 mL单标容量瓶。
1.2 试药
雷公藤多甙片，安徽新陇海药业有限公司生产（规格：10 mg；10批批号分别为100601、100602、100701、100901、101001、101201、101202、110202、110302、110301），黄石飞云制药有限公司生产（规格：10 mg；批号：20091201），上海复旦复华药业有限公司生产（规格：10 mg；批号：110501）。标示为安徽新陇海药业有限公司生产的雷公藤多甙片1批（标示批号：100822）。
2 方法与结果
2.1 实验室确证
依据国家食品药品监督管理局标准WS3-B-3350-98-2011测定，以甲醇-乙腈-水（64∶16∶20）为流动相，设置HPLC参数（柱温为25℃，检测波长为210 nm），记录色谱图（图1）。结果安徽新陇海药业、黄石飞云制药有限公司及上海复旦复花药业生产的12批雷公藤多甙片均符合规定，伪品不符合规定。
2.2 近红外光谱采集
取合格的雷公藤多甙片及伪品每批各随即抽取6片，用光纤探头抵住药片直接测定。按照指导原则设定近红外光谱仪参数，采用全国统一测定近红外光谱方法文件，光谱扫描范围为全波段12000～4000 cm-1，扫描次数32次，分辨率8 cm-1，共得到78张原始光谱，并计算出各批光谱的平均光谱。近红外光谱见封三图1。
2.3 一致性模型建立
取采集好的安徽新陇海药业生产的雷公藤多甙片近红外光谱图为参考光谱，设置波段为4200～7500 cm-1，平滑点17，CI限度为5.0。对光谱图逐次采取一阶导数、二阶导数、一阶导数+矢量归一化和二阶导数化+矢量归一化法对图谱进行处理，经比较发现用二阶导数+矢量归一化处理方法建立的模型错判误判最少，所以采用此种处理方法。
2.4 模型应用
为了考察模型的实际应用效果，分别采用上海复旦复华药业有限公司和黄石飞云制药有限公司生产的雷公藤多甙片及伪品对模型进行验证考察（封三图2）。结果模型能准确区分出不同厂家生产的雷公藤多甙片，实现了该厂生产的该药品“身份证“作用，并可以将伪品和正品区分出来，达到了快速准确鉴别真假雷公藤多甙片的目的。
3 讨论
近红外光谱区范围是4000～12000 cm-1，该区域主要是N-H、O-H、S-H、C-H等含氢基团振动光谱的合频及倍频吸收。因此，测量药品一次近红外光谱，就可以初步获得该药品各类化学成分定性或定量的数据，具有同时分析多种化学成分的能力[3-7]。
在建模过程中，近红外光谱谱段选择尤为重要，如果选择全谱段势必会增加干扰，错误选择有可能将特征峰遗漏。在实验过程中，笔者认真比对三个厂家生产的雷公藤多甙片及伪品的近红外光谱图（封三图3），发现黄石飞云制药有限公司生产的雷公藤多甙片光谱图在7194.0023 cm-1独有一峰而其它两厂没有，而安徽陇海药业有限公司生产的该药光谱图在6967.3180 cm-1处有一峰可以与其它两厂及伪品明显区分。
近红外光谱一致性检验方法可以无损伤、快速、准确地判断药品的真伪，是一种最常用快速比对模型，建立该方法至少需要参考样品3～5批次，参考光谱的数量应在20张以上时，才有较好的代表性，所以，正品的收集及实验室确证工作也很重要，这是建模工作的基本前提和根本保障。
由于雷公藤多甙片为中成药，成分复杂，药材的产地及质量，药材的加工方法等方面对近红外光谱都有很大影响，所以模型虽然建立，但后续模型补充工作也尤为重要，只有不断更新，才可以保证方法的适用性，减少假阳性的产生。
[参考文献]
[1] 张学博，尹利辉. 近红外光谱一致性检验方法用于快速判断药品质量的研究[J]. 药物分析杂志，2011，31（3）：603.
[2] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典（一部）[S]. 北京：中国医药科技出版社，2010：968.
[3] 刘伟，范可青，包艳春，等. 运用近红外光谱法对青霉素V钾片一致性检验的研究[J]. 药物分析杂志，2009，11（1）：125-127.
[4] 胡昌勤，冯艳春. 近红外光谱假药识别系统的设想及可行性探讨[J].中国药事，2004，18（1）：50-52.
[5] 冯艳春，胡昌勤. 近红外光谱法在药物分析中的应用[J]. 中国药事，2003，17（5）：312-314.
[6] 王梦雷，张雪峰. 运用近红外光谱法建立罗红霉素胶囊一致性检验模型的研究[J]. 中国当代医药，2012，19（23）：96-97.
[7] 耿仲乐，王静，张瑞，等. 利用近红外图谱比对法及一致性检验模型鉴别健胃消食片[J]. 中国药事，2012，26（18）：898-901.
（收稿日期：2013-05-27）
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