摘要：目的 探讨血清人附睾蛋白4（HE4）和糖类抗原125（CA125）水平联合检测在新疆维吾尔族卵巢恶性肿瘤诊断中的应用价值。方法 选取新疆维吾尔族病例：67例卵巢恶性肿瘤组患者、63例妇科良性肿瘤组患者和60例健康对照组，用ELISA法测定血清HE4水平，用ECLIA法测定CA125水平，计算ROMA风险概率，并比较三组间数据差异。结果 卵巢恶性肿瘤组血清CA125、HE4水平及ROMA与妇科良性肿瘤组、健康对照组比较明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05），而妇科良性肿瘤组血清CA125、HE4水平及ROMA与健康对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。CA125、HE4和ROMA三者对卵巢恶性肿瘤诊断灵敏度及特异度逐渐升高，对应ROC曲线下面积也递增，差异有统计学意义。结论 HE4的灵敏度和特异度均优于CA125，二者联合检测即ROMA可同时提高灵敏度和特异度，优于单独检测HE4或CA125。
关键词：卵巢恶性肿瘤；维吾尔族；人附睾蛋白4；糖类抗原125；诊断价值
卵巢癌是女性生殖系统常见肿瘤，居妇科肿瘤死亡原因之首，因其起病隐匿，缺乏敏感的早期敏感诊断工具，5年生存率低，约50%。目前已知经典的肿瘤标志物为CA125，对疾病诊断及检测复发有一定价值。近年来国内外学者对人附睾分泌蛋白4（ HE4） 和卵巢恶性肿瘤发病风险模型（ ROMA） 在卵巢癌中的应用做了相关研究[1，2]，结果提示HE4对卵巢癌的诊断价值优于CA125，二者联合检测及ROMA模型提高了卵巢上皮癌诊断的准确性，亚洲[3]的研究结果与西方多数研究结果一致。尚未有学者研究HE4对维吾尔族女性卵巢恶性肿瘤诊断价值。本文对HE4和CA125水平进行联合检测，并结合ROMA模型，探讨其在新疆维吾尔族女性卵巢恶性肿瘤诊断及鉴别诊断中的价值。
1资料与方法
1.1一般资料 研究病例共190例，均来自2012年1月～12月在新疆肿瘤医院住院并经术后病理结果确診的患者，其中健康对照组来自体检中心；①卵巢恶性肿瘤组：67例，其中浆液性腺癌24例，粘液性腺癌20例，内膜样腺癌17例，透明细胞癌4例，支持-间质细胞瘤2例。②妇科良性肿瘤组： 63例，其中卵巢巧克力囊肿16例，卵巢粘液性囊腺瘤18例，卵巢腺纤维瘤8例，卵巢成熟性畸胎瘤17例，输卵管副中肾源性囊肿4例。③健康对照组：选取我院同期体检中心体检合格的健康女性60例，均无个人肿瘤史或家族肿瘤史。三组病例均未合并中重度内科疾病或其他系统恶性肿瘤。
1.2标本采集及保存 体检者及住院患者（手术前）空腹肘静脉采血4ml，静置30min后，3000r/min离心5min，分离收集血清，-80℃冰箱保存待测。
1.3试剂与仪器 HE4 （ 酶联免疫吸附法，试剂盒购自瑞典Fujirebio Diagnostics公司），CA125 （电化学发光法，试剂盒购自瑞士Roehe 公司），BIO-RAD model 680酶标仪（美国Bio-Rad公司），E170电化学发光免疫分析仪（瑞士Roehe公司）。
1.4检测结果判定标准 CA125正常范围为0-35U/ml，HE4正常范围为：70pmol/L（绝经前）、140pmol/L（绝经后），ROMA引用Moore 等[4]提出的计算公式：绝经前患者预测指数（ predictive index，PI）=-12.0+2.38×LN（HE4）+0.0626×LN（CA125），绝经后患者PI=-8. 09+1.04×LN（ HE4）+0.732×LN（CA125）。预测概率（ predicted probability，PP）=Exp（PI）/[1+Exp（PI）]×100。并以PP>13.1% （绝经前）及PP>27.7%（绝经后）作为截断点，判断卵巢癌高风险组及低分险阻。
1.5统计学分析方法 应用SPSS 16.0软件进行统计分析，正态分布计量资料使用x±s表示，多组间比较使用方差分析，偏态分布计量资料使用中位数（四分位数）表示，两组间比较采用t"检验，多组间比较采用非参数Kruskal -Wallis秩和检验，再采用Mann-Whitney U检验进一步做两两比较；计数资料组间比较采用χ2检验，采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic，ROC），比较HE4、CA125和ROMA诊断卵巢恶性肿瘤的价值，检验水准α=0.05。
2结果
2.1各组病例基本资料 三组病例中，年龄跨度类似，方差分析提示三组间年龄均值差异无显著性，绝经前及绝经后病例分布均匀，见表1。
2.2 CA125、HE4及ROMA频数分布图 由图1可见，三组数据频数分布图符合右偏态分布，不符合正态分布模型，三组间数据比较选择非参数Kruskal-Wallis秩和检验。
2.3各组CA125、HE4及ROMA水平比较 各组血清CA125、HE4（绝经前、绝经后）和ROMA（绝经前、绝经后）相比，χ2值分别为43.68、16.49、10.96、15.14、10.60，均P<0.01，提示三组数据差异有显著性。以非参数Mann-Whiney U检验进一步行两两比较，卵巢恶性肿瘤组与妇科良性肿瘤组、健康对照组比较，U值分别为209、44、28、60、48，均P<0.05，提示卵巢恶性肿瘤组患者血清三项指标（以下指CA125、HE4绝经前、绝经后和ROMA绝经前、绝经后）中位数均明显高于妇科良性肿瘤组及健康对照组，差异有显著性；妇科良性肿瘤组和健康对照组比较，P>0.05，两组间血清三项指标差异无显著性。三组病例HE4、ROMA在绝经前及绝经后病例间差异无显著性，见表2。
2.4 CA125、HE4及ROMA对卵巢恶性肿瘤诊断价值比较 由表3可见，CA125、HE4和ROMA三者对卵巢恶性肿瘤诊断灵敏度及特异度逐渐升高，对应ROC曲线下面积也递增，差异有统计学意义。图2可更为直观观察三者对卵巢恶性肿瘤诊断价值。
3讨论
人附睾分泌蛋白4（human sapiens epididymis specific protein 4，HE4）是1991年由Kirchhoff等[5]在男性附睾组织中发现的。2009年Li 等[6]研究发现HE4 基因在人类染色体20q12～13.1上，这一区域的染色体是卵巢癌变异基因表达最频繁的区段[7，8]。HE4基因在卵巢癌组织中高表达，在正常卵巢组织中不表达或低表达。有研究显示，敲除HE4基因的卵巢癌细胞将无法从G1期进入S期，提示HE4能抑制卵巢癌细胞的增殖和转移，是抗肿瘤基因。分泌型HE4已经在卵巢癌患者的血清中检测到有高水平表达。2003年Hellstrm等[1]通过ELISA法对比检测HE4和CA125在绝经后妇女血清的水平，提出HE4可以作为诊断卵巢癌的肿瘤标志物，并且比CA125更有优势。自此，掀起了国内外研究HE4在诊断卵巢癌中的价值的热潮。近年来国内研究表明HE4单项检测诊断卵巢癌的特异度优于CA125 ，两者联合检测可以提高检测敏感度。
本研究显示CA125、HE4在新疆维吾尔族女性血清中可被检测到，且符合右偏态分布。卵巢恶性肿瘤组血清HE4水平明显高于妇科良性肿瘤组及健康妇女组，差异有统计学意义，在妇科良性肿瘤组及健康妇女组之间差异无统计学意义，提示HE4可作为卵巢恶性肿瘤诊断及鉴别指标之一，与国内外研究结果相同。绝经前与绝经后病例比较，HE4水平差异无统计学意义，故在后续评价HE4及ROMA诊断卵巢恶性肿瘤价值中未再依据是否绝经分亚组。其与本研究所选病例年龄跨度大，且标本量较少有关，后续研究可划定年龄范围，大样本收集维吾尔族女性血清标本，测定HE4正常值范围，并进一步观察HE4与年龄及是否绝经有无相关性。
与诊断"金标准"病理结果比较，HE4诊断卵巢恶性肿瘤灵敏度及特异度分别为85.7%、80.4%，均高于CA125（76.1%、77.1%），差异有统计学意义。ROMA模型为综合HE4及CA125水平所计算出的发病风险值，其对卵巢恶性肿瘤诊断价值为二者的结合。ROMA的灵敏度及特异度（87.5%、86.7%）较HE单独检测更高，提示联合CA125和HE4可提高卵巢恶性肿瘤诊断效率。ROC曲线下面积可更为直观的显示三者诊断价值排序，即ROMA>HE4>CA125。这一结果与国内多数汉族病例研究结论一致[9，10]，HE4对于新疆维吾尔族女性卵巢恶性肿瘤同样有诊断及鉴别诊断价值。调查新疆维吾尔族人群卵巢恶性肿瘤的发病率，可进一步计算HE4及ROMA的阳性预测值、阴性预测值，为临床诊断决策提供更多信息。
参考文献：
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编辑/申磊
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